Genetic incorporation of multiple unnatural amino acids into proteins in mammalian cells

Angew Chem Int Ed Engl. 2013 Dec 23;52(52):14080-3. doi: 10.1002/anie.201308137. Epub 2013 Nov 8.

Abstract

An enhanced suppression system enables the expression of proteins in mammalian cells incorporating one unnatural amino acid (UAA) into multiple sites, as well as two different UAAs into distinct sites in a protein of interest. The utility of this technology was demonstrated by generating a full-length antibody, site-specifically conjugated to a drug and a fluorophore, and characterizing its activity in vitro (see picture). Picture was cropped to fit the available space.

Ein verbessertes Unterdrückungssystem ermöglicht die Expression von Proteinen in Säugerzellen unter Einbau einer nichtnatürlichen Aminosäure (UAA) an mehreren Stellen sowie zwei verschiedener UAAs an bestimmten Stellen in einem Protein. Die Nützlichkeit dieser Technik wurde durch den Aufbau eines kompletten Antikörpers mit ortsspezifischer Konjugation zu einem Wirkstoff und einem Fluorophor sowie seine In-vitro-Charakterisierung gezeigt (siehe Bild).

Keywords: antibodies; conjugation; gene expression; proteins; unnatural amino acid.

Publication types

  • Research Support, U.S. Gov't, Non-P.H.S.

MeSH terms

  • Amino Acids / chemistry
  • Amino Acids / genetics*
  • Animals
  • Antibodies
  • Gene Expression
  • Humans
  • Proteins / chemistry
  • Proteins / genetics*

Substances

  • Amino Acids
  • Antibodies
  • Proteins