目的: 评估免疫组织化学染色的新底物辣根过氧化物酶(HRP)Magenta在明视场下的运用特点,包括特异度、灵敏度、重复性、稳定性和抗干扰能力。 方法: 收集2021年1月至2023年12月南京大学医学院附属鼓楼医院的人体癌旁组织12例和肿瘤组织芯片176例,根据染色底物不同分为3,3′-二氨基联苯胺(DAB)组和Magenta组。(1)对不同组织的细胞定位和亚定位的抗体行Magenta和DAB显色比较,观察两者一致性;(2)通过对Magenta显色切片在不同环境(低温、常温、高温)下的存储以及接触有机溶剂(乙醇、二甲苯、丙酮、1%盐酸乙醇、0.3 mol/L硫酸、高锰酸钾等)观察其稳定性;(3)通过添加苏木精、DAB,观察其对Magenta显色信号的干扰情况。 结果: (1)Magenta组细胞核、质、膜等定位准确,(30±2)s出现淡粉红信号,(180±5)s完成显色,反应速度与DAB组相比,差异无统计学意义(P>0.05),显色性能与DAB组相比有较高的一致性(cohenκ=0.957),特异度和灵敏度为96.0%和99.2%;(2)Magenta显色切片在不同环境下存储不会发生信号改变,同时能耐受乙醇、二甲苯、丙酮、1%盐酸乙醇、0.3 mol/L硫酸等有机溶剂,但不能与氧化剂接触;(3)Magenta与DAB和苏木精共同染色时,阳性信号互不干扰。 结论: 在免疫组织化学染色性能上,HRP Magenta与DAB相比阳性信号色彩更鲜明,同时稳定性好,易于长久保存,可作为免疫组织化学HRP酶底物的新选择。.